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流式细胞术实验全攻略:从准备到分析 流式细胞技术是一种利用流式细胞仪进行单细胞定量分析和分选的方法。它结合了单克隆抗体、免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高科技手段,能够从单细胞水平区分异质性细胞群体。检测对象包括悬浮细胞、贴壁细胞、从实体组织分离的单细胞悬液以及其他生物颗粒。 细胞表面染色步骤 样本准备 采集全血或组织(如脾、淋巴结、胸腺和骨髓),用细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)制成单细胞悬液。对于体外刺激的细胞,直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)中,然后进行下一步。 加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS),300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 红细胞裂解 如需裂解红细胞(如脾脏),将10x红细胞裂解液(ACK buffer)用去离子水稀释到1x,放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中,室温孵育2-3分钟。如不需要裂解红细胞,直接进入下一步。 加入10mL细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)终止红细胞裂解,300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 重复洗涤一次,加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)至15mL,300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 细胞计数,用细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)将细胞制成1x107/mL悬液。将100细胞悬液加入2mL EP管中备用。 封闭Fc受体 封闭Fc受体能减少染色过程中的非特异性染色。 在小鼠中,纯化的CD16/CD32单抗能和FcⅢ/Ⅱ结合,封闭非特异性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入0.5-1纯的抗小鼠CD16/32单克隆抗体,室温孵育10分钟。 对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化Ig或者相同来源血清进行阻断,或者用商业化的Fc受体阻断剂。 细胞染色 按照说明书的推荐用量加入荧光标记的抗体,混匀后置于4℃,避光孵育30分钟。 加入适量细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)重悬细胞,300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 加入0.2 mL细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 通过以上步骤,你可以有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体,检测各种细胞类型。希望这篇攻略能帮助你顺利完成流式细胞术实验!
港科大分析化学硕士:读一年值一年! 如果你正在考虑读港科大的分析化学硕士,那你可得好好了解一下这个课程!这一年可是相当香的!港科大(HKUST)的化学系提供了一个为期一年的全日制或两年的非全日制分析化学理学硕士课程(Master of Science in Analytical Chemistry, MSc(ANCHEM))。这个课程专为化学或相关领域的学士学位毕业生设计,目标是培养分析实验室的专业人员。 背景与入学要求 늩斥 ,你得有化学或相关领域的学士学位,并且学术表现要好。港科大可是挑人的,所以别想着随便申请就能过。 课程结构 这个课程一共需要修30学分,分为核心课程和实验/实践课程。核心课程包括: 化学数据分析(Chemical Data Analysis, CHMS 5010):涉及数据的测量、统计处理和分析,还有校准、检测限、干扰、标准和控制图的使用、质量控制和保证、数据的呈现等等。 元素分析(Elemental Analysis, CHMS 5020):包括原子光谱学、原子吸收(AA)、原子发射(AE)、ICP MS元素分析、同位素分析、X射线使用的元素分析、X射线荧光(XRF)、X射线光电子能谱(XPS)、二次离子质谱、能量色散X射线分析(EDAX)、燃烧分析。 分子分析(Molecular Analysis, CHMS 5030):涵盖有机分子的表征、质谱、电离技术、质量分析、蛋白质质谱、核磁共振光谱、1H和13C NMR、多核实验、二维和脉冲技术、固态NMR。 分离方法(Separation Methods, CHMS 5040):包括色谱技术、气相色谱、GC-MS、液相色谱、HPLC、固定相和流动相的选择、手性分离、亲和色谱、离子色谱、毛细管区带电泳、微流控。 光学和电学方法(Optical and Electrical Methods, CHMS 5050):涉及分子光谱学、振动(红外和拉曼)和电子(紫外-可见)光谱学、荧光、电化学分析、氧化还原化学和生物化学、电化学测量、pH测量、传感器的设计和使用。 实验/实践课程则包括分析仪器实验室 I、分析仪器实验室 II、分析研究项目等。 职业发展与前景 颀 毕业后,你可以担任化学分析师、质量控制技术员、环境科学家、食品安全分析师、法医科学家等职位。也适合从事科研、高等教育机构、医药公司或化学分析服务公司的工作,参与复杂的分析项目的设计和实施。 费用 𐊦襤秺榘ﱶ0,000HKD,具体费用可能会有些变动,建议提前确认。 总的来说,港科大的分析化学硕士课程真的是非常全面和实用的,读完之后你会发现这一年花得值!如果你对分析化学感兴趣,不妨考虑一下这个课程!
苹果手机演唱会摄影技巧,轻松拍出大片! 昨晚有幸在兰州玫瑰奥体中心观看了张杰的演唱会,作为一个480看台的小粉丝,我拍到了超级美的星光棒和震撼的全场画面!今天就来分享一下我的拍照小技巧,保证你也能拍出同样好看的照片! 拍照小贴士 镜头清洁:拍照前一定要用镜头布把镜头擦干净,不然照片会模糊哦! 关闭闪光灯和夜间模式:这样拍出来的照片才不会有过多的噪点。 曝光调整:将曝光调整到-0.3,照片效果会更好。 拍荧光棒的技巧 把荧光棒放在左下角,然后拉低荧光棒处的小太阳☀️,这样荧光棒会非常清晰,背景会虚化,氛围感十足!具体操作可以参考下面的图片(p2-p8)。 拍全场的技巧 用0.8x变焦拍摄全场,稍微拉低一点曝光,避免镜头前有光源干扰。具体参数可以参考下面的调整: 曝光:-9 鲜明度:+30 高光:-18 阴影:+20 对比度:+14 亮度:17 黑点:+5 自然饱和度:+15 字体:思源宋体(细) 小结 通过这些简单的调整,你也能拍出像我一样绝美的演唱会照片!希望大家都能拍出自己满意的照片,记录这场青春的约定。我们下期再见!
「肖战超话」「我们的多棱镜」xz「肖战专辑我们」 走向远方,走向点点荧光。不同色调的情绪、不同情境的感受,这些情绪的切片都是组成“我们”的一部分,经历、感受、成长,众生百相,亦复如是。@X玖少年团肖战DAYTOY[送花花][送花花][送花花] 「肖战专辑我们」[心]「肖战新歌背景音是粉丝的声音」 肖战顺顺利利,肖战平安喜乐 肖战我喜欢你,肖战好帅 肖战工作室的微博视频
浙大读博日常:细胞骨架免疫荧光初体验 最近在浙大读博,终于鼓起勇气尝试了一下细胞骨架染色,用的是鬼笔环肽来标记微丝。虽然第一次做,但效果还不错,至少能清楚看到微丝的存在,真是让人开心得不得了。为了拍这些照片,我可是花了四个小时在共聚焦显微镜下,真是要看吐了。不过,老板花了五百大洋,值了! 实验步骤如下: 固定细胞:用4%多聚甲醛室温下固定20分钟。 破膜处理:加入0.1%的Triton X-100,室温下处理5分钟。 封闭:用BSA封闭液室温下封闭0.5到1小时。 一抗孵育:用OPN抗体,4℃过夜孵育。 二抗染色:用AF488标记的二抗,室温下处理1小时。 Actin染色:用Tracker Red 555微丝荧光探针染色。 DAPI染色:用DAPI染料室温下处理10分钟。 封片:用抗荧光淬灭封片剂(5ul)和指甲油封片。 保存:用锡箔纸包好,4℃保存。 有个小疑问,为什么细胞核有的大有的小?那些小小的细胞核是不是也是BMSC?还是说原代培养中混入了其他细胞?或者是还没长开的年幼BMSC?又或者是已经成骨分化的成骨细胞? 顺便问一下,有没有好用的DAPI推荐?我这次用的DAPI染了十分钟,拍的时候电压调到180还要降背景才能拍出这种效果,真是累得不行。
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nc膜孔径 젦⧴⠃YTIVA 的创新世界,我们为您带来了 Protran 0.2 NC 膜,专为蛋白质印迹检测设计的高性能膜材料。这款膜产品以其卓越的孔径控制,0.2 的精确尺寸,为科研人员提供了可靠的分离和纯化工具。 ᠐rotran 0.2 NC 膜的特点: 孔径精确至 0.2 ,确保蛋白质的精确分离 低背景干扰,高信噪比,简化洗涤步骤 与多种印迹标记和检测系统兼容,提升实验效率 小蛋白的高结合能力,降低“透膜”风险,适合小于 20,000 Dalton 的蛋白质 经过优化,适用于化学发光和荧光检测,提供清晰、持久的信号 规格与包装: 尺寸:300 mm x 4 m 包装:1 卷/包 材料:硝酸纤维素 (NC) 𘎥혥诼 可高温高压灭菌,确保实验安全 蒸汽高压灭菌条件下,结合蛋白与转移膜的保质期更长 应用领域: Western、Southern 和 Northern 印迹 结合载量:150~176 ⵧ IgG/cmⲯ),20~72 ⵧ BSA/cmⲯ) 选择 Protran 0.2 NC 膜,让您的蛋白质印迹实验更加精准、高效。
如何评估古玩、古董和文物的价值? 评估古玩、古董和文物的价值可不是一件简单的事,需要综合考虑很多因素。下面我给大家分享一些方法和步骤,希望能帮到你们。 一、确认物品的真实性和合法性 真实性鉴定 首先,你得确保这件东西是真的。这时候,专业的鉴定机构或者专家就能派上用场了。他们可以通过分析物品的材质、工艺、风格和年代特征来判断真假。比如,古代瓷器的胎质、釉色、纹饰和造型都是鉴别真伪的关键。书画作品则可以从纸张、笔墨、落款和印章等方面进行判断。 不过,科学检测手段比如热释光测年和X射线荧光分析也能提供一些科学依据,但这些方法也有局限性,不能完全替代传统的鉴定方法。所以,最好是多种手段综合判断。 合法性审查 接下来,要确保这件东西的来源是合法的,不是通过盗窃、走私等非法手段获得的。特别是文物,一定要符合国家文物保护法的规定,看看能不能合法交易和收藏。如果来源不明或者有法律风险,那它的价值可能会大打折扣,甚至可能面临被没收的风险。 二、评估历史价值 确定年代 准确判断物品的制作年代是评估历史价值的基础。你可以通过查阅历史文献、考古研究成果和专业鉴定书籍来了解不同时期的物品特征。比如,青铜器的纹饰风格和铭文内容可以帮助你判断它属于哪个历史时期。 考虑历史地位 还要看看这件物品在历史进程中的地位和作用。如果它与重大历史事件、著名人物相关联,或者某个历史时期的代表性作品,那它的历史价值就会更高。比如,一件与某位历史名人用过的器物,或者是某个朝代的官窑瓷器,其历史价值自然会提升。 研究历史背景 深入了解物品所处的历史背景也非常重要。包括当时的社会、政治、经济和文化等方面的情况。这有助于你更好地理解物品的制作目的、用途和意义。例如,一件古代的农具可以反映当时的农业生产方式;一件宗教文物可以体现当时的宗教信仰和文化传统。 三、评估艺术价值 芨肋的价值评估相对复杂一些,需要考虑创作背景、工艺水平、设计风格等多个方面。你可以通过查阅艺术史资料、参观艺术展览或者咨询艺术专家来了解更多相关信息。 希望这些方法能帮到你,让你在评估古玩、古董和文物时更加得心应手!
奒术回战马口铁徽章新品发布!劰奒术回战马口铁徽章新品发布,带你进入奇幻的咒术世界! 热血激战,开启你的冒险之旅~ ꊊ产品亮点 大隐藏款1款,小隐藏款1款,常规款16款,精美设计等你来收集! 褺祓信息芤名称:咒术回战马口铁徽章常规系列 产品型号:YZS-WBZJ- 材质:马口铁 尺寸:90x65x100mm 建议零售价:15元/包,90元/盒 楌 装规格抶包/中盒,60中盒/箱 单包条形码:69738301388249 中盒条形码:无 ᧉ릏示ኦ줺祓不在闲鱼销售,请认准正版。 物效果展示꧄𖥅效果:正面效果、自然光效果、暗光下效果、紫光灯照射效果。 暗光效果:暗光下效果、紫光灯照射效果。 𘨧色展示𘊥䧩藏款:五条悟,在日光下背景呈现珠光效果,暗光环境下背景有夜光效果。 小隐藏款:七海建人,角色背后的溅射元素在灯或暗光环境下形成高亮的荧光橙。 常规款:共16款,包括MEGUMI、NOBARA、ATORU、PANDA、VEGLWI、VOBARA、MAKT、SUGURU、TOGE、MAHITO等角色。 快来收集这些精美的咒术回战马口铁徽章,开启你的奇幻之旅吧!
𘧬쥛套人民币贰圆纸币价值揭秘 第四套人民币的贰圆纸币,发行于1988年5月10日,于2004年只收不付,2018年5月1日正式退市,成为收藏家们的心头好。 该纸币的规格为135mm x 57mm,印刷工艺独特,802版本采用正面背面凹印,而902版本则正面凹印、背面胶印,使得每一枚都充满了艺术感。 𐨯𗥀802版本虽然曾经一度被看作是收藏市场的热门,但价格并未冲破百元大关,如今市场价格维持在25元左右。而902版本,因其独特的荧光油墨技术,曾一度被誉为“绿幽灵”,价格也一度飙升,但如今价格已回落至七八十元。不过,普通902的散币价格一直稳定在15元左右,刀货价格维持在1800元左右,表现依然亮眼。 ᦀ来说,第四套人民币贰圆纸币的价值受多种因素影响,包括市场供需、历史背景、印刷工艺等。对于收藏家来说,了解这些影响因素有助于做出更明智的投资决策。
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